生命科学学院孔道春实验室说明真核细胞岗崎片
来源:版权网 发表于2019-07-08 08:43:10 编辑:黄仁勋
摘要: 岗崎片段(Okazaki fragments)的发现现已曩昔50多年了,但真核细胞岗崎片段加工的分子机制一向没有得到终究确认。人细胞的一次成长割裂,大约组成5 x 1

  岗崎片段(Okazaki fragments)的发现现已曩昔50多年了,但真核细胞岗崎片段加工的分子机制一向没有得到终究确认。人细胞的一次成长割裂,大约组成5 x 107岗崎片段。一个岗崎片段的均匀巨细约是125 nt,它的5端含有~34核苷酸的RNA-DNA引物。这段引物是由低保真的primase-DNA pol α 组成。为了能让岗崎片段连接起来构成一个接连的后随DNA链(lagging strand),这个RNA-DNA引物有必要要从每一个岗崎片段里切除去。所以,岗崎片段加工是细胞里DNA transactions最丰厚的事情,并且它直接关系到基因组的稳定性。

  为什么真核细胞岗崎片段加工的分子机制一向不能被确认呢?主要有两个原因:1)缺少能在体内直接检测去除~34核苷酸的RNA-DNA引物的办法;2)应该有多个酶参加去除RNA-DNA引物,它们之间存在必定程度的功用互补,导致无法明确地确认哪些酶参加岗崎片段加工。曾经,岗崎片段加工的分子机制研讨主要是在体外进行,再加上一些有限的遗传学剖析。通过30年的研讨,科研人员提出了或许存在的加工岗崎片段的途径,但不同实验室有十分不同的观念。因为缺少体内的直接依据,真核细胞去除岗崎片段上RNA-DNA引物的分子机制一向无法终究确认(Kao Bambara (2003) The protein components and mechanism of eukaryotic Okazaki fragment maturation. Crit. Rev. Biochem. Mol. Biol.38, 433-452)。

  岗崎片段加工机制的模型图

  北京大学生命科学学院孔道春教授研讨组开展了一种体内直接检测去除RNA-DNA引物的办法。他们初次用电镜调查到了仿制叉里的翘起结构(flap structure),证明了翘起结构的存在;并进一步证明这个翘起结构来自于RNA-DNA引物。他们证明了真核细胞用两种办法去除RNA-DNA引物:Flap切开途径(Flap pathway)和外切酶途径(Exonucleolytic pathway)。Flap pathway可再分为long flap pathway及short flap pathway,他们进一步确认Dna2、Fen1、Exo1、RNase H2参加了这些途径。由此,真核细胞岗崎片段加工老练的分子机制得到终究说明。文章宣布在Journal of Biological Chemistry(292:4777-4788, March 24, 2019)。

  修改:安定

  

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